子科生物報道：圣路易斯華盛頓大學醫(yī)學院的研究人員近日報告了一種檢測急性髓系白血?。ˋML）的新方法，有望徹底改變這種疾病的檢測和治療方式。這種基于數(shù)字PCR的檢測方法可以改善由KMT2A基因融合驅(qū)動的白血病檢測，并有可能影響治療決策和應答評估。

這篇題為“Droplet Digital PCR for Oncogenic KMT2A Fusion Detection”的論文發(fā)表在《The Journal of Molecular Diagnostics》雜志上。

急性髓系白血病是一種罕見的侵襲性癌癥，全球每年約有12萬人確診。治療過程中殘留病灶的檢測對于評估預后和指導治療決策至關(guān)重要。目前，在AML治療過程中，檢測微小殘留?。∕RD）的方法包括骨髓形態(tài)學、多參數(shù)流式細胞術(shù)（MPFC）和DNA測序。

形態(tài)學評估只能檢測到5%的白血病細胞。多參數(shù)流式細胞術(shù)的檢測靈敏度更高，可達0.01%至0.001%，但在實施和解釋方面具有挑戰(zhàn)性，而且不同實驗室之間沒有標準化。DNA測序方法可以通過體細胞突變圖譜來識別白血病細胞，但這種方法價格昂貴，而且可能會受到非白血病血細胞的干擾。

通訊作者、圣路易斯華盛頓大學醫(yī)學院腫瘤學系的Grant A. Challen博士解釋說：“致癌融合通常是疾病的特征，也是白血病細胞的獨特標志物，通常不存在于健康細胞中。其他疾病，比如慢性髓系白血病（CML），可以通過典型的BCR-ABL融合來追蹤，靈敏地檢測這些融合已經(jīng)徹底改變了CML的治療方式。”

“對于帶有致癌融合的AML患者，KMT2A融合是一種分子標志物，可實現(xiàn)靈敏的殘留病檢測。因此，我們希望開發(fā)出一個靈敏的KMT2A融合檢測平臺，以改進我們檢測和治療這種疾病的方式，”他說。

研究人員利用微滴式數(shù)字PCR（ddPCR）技術(shù)開發(fā)出一種新型檢測方法，能夠?qū)ξ鍌€最常見的KMT2A融合伴侶進行檢測。目前已知有80個KMT2A融合伴侶，但大約80%的融合只涉及到五個伴侶 – AF9、AF6、、AF4、ELL和ENL。

他們在人類細胞系和患者樣本中對這種方法進行基準測試，以證明KMT2A融合檢測的靈敏度和特異性。實驗將cDNA分子分液到微流控液滴中，這些液滴利用引物和探針進行檢測，只有當融合轉(zhuǎn)錄物存在時才會產(chǎn)生陽性信號。他們將針對不同融合的多個引物/探針組合成一種混合的融合檢測試劑。

Challen博士指出：“我們發(fā)現(xiàn)，這種檢測方法不會在健康個體的樣本中產(chǎn)生假陽性信號。它很容易擴展，以包含更多的致癌融合。這有望幫助醫(yī)生確定治療方案和評估應答狀況。了解治療是否有效，對于決定何時升級治療或進行造血干細胞移植至關(guān)重要?！?/p>

他總結(jié)道：“這是一種可以靈敏檢測KMT2A融合的強大工具，適用于由這些融合驅(qū)動的白血病患者的疾病檢測。它填補了致癌融合檢測的空白，并帶來了一些技術(shù)改進。這種檢測方法還具有可擴展性，可輕松添加其他融合，以便覆蓋更大的范圍。我們正在逐步改進血癌的檢測！”